實(shí)消

進(jìn)料

消前體積=計料體積-消毒蒸汽冷凝水-消后合料體積-接種/移種體積，此時進(jìn)料量以消前體積計。所用發(fā)酵罐罐體和補(bǔ)料均有稱重設(shè)備，建議所有濃度均已質(zhì)量分?jǐn)?shù)計算。
配料時應(yīng)充分考慮每種物料的性質(zhì)，濃酸、片堿禁止直接混合，大多數(shù)金屬離子、銨離子在酸性環(huán)境消毒，消后調(diào)pH，有豐富氮源的培養(yǎng)基葡萄糖分消，用量很少的物質(zhì)配成母液按比例添加，不能耐受高溫消毒的組分采用過濾除菌，接種前在火焰保護(hù)下加入或者補(bǔ)料形式加入。
? 進(jìn)罐前確認(rèn)罐內(nèi)清洗干凈、罐底閥關(guān)閉、電極已校準(zhǔn)安裝。
? 投料后加水至消前體積/質(zhì)量。

夾套預(yù)熱

? 打開攪拌，低轉(zhuǎn)速，建議小于200rpm，如有大量豆粉、淀粉等不溶物質(zhì)，適當(dāng)開空氣。
注意：如需使用空氣，須打開旁路閥門，將質(zhì)量流量計前后閥門關(guān)閉，避免使用質(zhì)量流量計控制流量，以防止出現(xiàn)意外時損毀質(zhì)量流量計。
? 確認(rèn)夾套進(jìn)水閥門關(guān)閉、夾套出水閥門關(guān)閉，尾氣分析取樣閥關(guān)閉；排氣閥全開。
? 打開夾套排凝閥門，緩慢打開蒸汽進(jìn)夾套閥門，注意觀察夾套壓力表，壓力不得高于0.2MPa，待夾套水排盡后，開大夾套進(jìn)蒸汽閥，快速預(yù)熱升溫；等待溫度到達(dá)95℃以上后，執(zhí)行下一步（對于沒有配備夾套排污疏水閥的產(chǎn)品，可以適當(dāng)關(guān)小夾套排污閥）。
? 確認(rèn)質(zhì)量流量計前后閥門關(guān)閉，質(zhì)量流量計旁路閥門打開；保持轉(zhuǎn)子流量計閥門和空氣進(jìn)過濾器閥門開，關(guān)閉空氣進(jìn)罐隔膜閥，關(guān)閉蒸汽進(jìn)夾套閥門，保持夾套排冷凝水閥門全開，關(guān)閉攪拌。
? 如果需要過濾器系統(tǒng)同步滅菌，保持質(zhì)量流量計旁路閥門、轉(zhuǎn)子流量計閥門開啟，關(guān)閉空氣進(jìn)過濾器閥門和空氣進(jìn)罐隔膜閥，然后按照3.3 操作。
注意：如果需要減少罐內(nèi)冷凝水量，蒸汽進(jìn)夾套閥門可以保持一定較小的開度。

罐內(nèi)進(jìn)蒸汽

? 打開罐底進(jìn)蒸汽閥門，緩慢打開取樣閥，待沒有冷凝水大量流出后，維持取樣口有少許蒸汽冒出，打開罐底閥進(jìn)蒸汽，打開蒸汽進(jìn)空氣分布器閥門。溫度到達(dá)100℃后，關(guān)小排氣閥門，升溫升壓。

保壓

? 溫度到達(dá)120攝氏度后，關(guān)小罐底進(jìn)蒸汽閥門，用蒸汽進(jìn)空氣分布器閥門和排氣閥控制溫度維持在121±1℃。
? 保壓30min或者按工藝時間。
? 保壓過程中，保持接種口松動（由擰緊狀態(tài)擰松半圈到一圈，建議在升溫以前擰松，強(qiáng)烈不建議在帶壓狀態(tài)操作），使接種口排氣口有蒸汽冒出。

滅菌結(jié)束后自然降溫降壓

? 保壓結(jié)束后，關(guān)閉罐底閥，關(guān)閉蒸汽進(jìn)空氣分布器閥門，根據(jù)具體物性選擇全關(guān)或者保持開度排氣閥門。
注意：排氣降溫降壓會使得發(fā)酵液一直處于劇烈沸騰狀態(tài)，對于易氣泡的發(fā)酵液禁止采用這種方式降溫。

通氣后一次水冷卻

? 罐溫降低到110攝氏度后，打開空氣進(jìn)罐隔膜閥進(jìn)空氣，并僅能用此法門調(diào)整進(jìn)氣流量，根據(jù)物性調(diào)整排氣閥門開度。
注意：易氣泡發(fā)酵液應(yīng)維持較高的罐壓，使得溫度始終低于沸點(diǎn)；易氣泡發(fā)酵液通氣量不宜過大。
? 依次確認(rèn)循環(huán)水進(jìn)水閥門關(guān)，循環(huán)水排水閥門關(guān)，一次水排水閥門開，一次水進(jìn)水閥門開；依次打開夾套排水閥，關(guān)閉夾套拍冷凝水閥，打開夾套進(jìn)水閥，控制面板開手動冷卻。打開攪拌通常不高于200rpm。
注意：通水冷卻前一定要先通空氣維持罐壓；冷卻過程中隨時用排氣閥控制罐壓不低于0.05Mpa。

待用

? 溫度降低到60℃后溫度設(shè)為自動；如需使用循環(huán)水，按以下步驟依次操作：
? 關(guān)閉控溫度控制。
? 關(guān)閉一次水進(jìn)水閥門。
? 關(guān)閉一次水排水閥門。
? 打開循環(huán)水回水閥門。
? 打開循環(huán)水進(jìn)水閥門。
? 控制面板打開溫度自控。

改為質(zhì)量流量計控制

? 確認(rèn)轉(zhuǎn)子流量有讀數(shù)。
? 控制面板設(shè)定質(zhì)量流量計流量為1vvm以上，并開啟自動。
? 依次全開質(zhì)量流量計前后閥門。
? 觀察面板上質(zhì)量流量計，當(dāng)質(zhì)量流量計讀數(shù)達(dá)到設(shè)定值后，緩慢關(guān)小質(zhì)量流量計旁路閥門，直至關(guān)閉。
注意：若質(zhì)量流量計流量讀數(shù)沒有達(dá)到設(shè)定值，可以嘗試慢慢關(guān)小質(zhì)量流量計旁路閥門，并觀察質(zhì)量流量計讀數(shù)是否增加，如果增加，可以繼續(xù)操作。
注意：質(zhì)量流量計旁路關(guān)閉過程中，過濾器壓力和罐壓會下降，需要及時調(diào)整。
? 調(diào)整空氣進(jìn)過濾器隔膜閥和排氣閥，使得過濾器壓力在0.1MPa，罐壓0.05MPa。
注意：過濾器壓力過高會使得質(zhì)量流量計前后壓差不足導(dǎo)致無法穩(wěn)定控制，出現(xiàn)流量鋸齒狀。出現(xiàn)此現(xiàn)象要降低過濾器壓力。
注意：過濾器壓力高于罐壓0.05MPa可以在一定程度上避免在空氣系統(tǒng)失壓導(dǎo)致料液進(jìn)入空氣管路。

標(biāo)定DO滿度

? 達(dá)到培養(yǎng)溫度、壓力后，DO標(biāo)定滿度。

空消

? 取下pH、DO等電極，僅僅保留溫度電極，用悶頭將電極接口堵住。
? 向罐內(nèi)加水沒過溫度電極，也可以空罐消毒。
? 以下同實(shí)消夾套預(yù)熱至一次水降溫過程。

過濾器消毒

? 確認(rèn)空氣進(jìn)過濾器閥門關(guān)閉、空氣進(jìn)罐隔膜閥關(guān)閉。
? 打開過濾器外殼旁路、隔膜閥旁路閥門。
? 打開蒸汽閥門，調(diào)整隔膜閥旁路閥門開度，使得出口有少量蒸汽和水流出，過濾器排凝閥保持開度一圈左右，調(diào)整蒸汽進(jìn)過濾器閥門開度維持過濾器壓力0.10-0.20Mpa 30min。
注意：隔膜閥旁路閥開度過大會使得維持壓力所需蒸汽流量升高，可能會使得過濾器穿孔。
? 依次關(guān)閉隔膜閥旁路、過濾器外殼旁路、蒸汽進(jìn)過濾器閥門。
? 立即微開隔膜閥旁路，待過濾器外殼壓力低于空壓后，打開空氣進(jìn)過濾器閥門使空氣進(jìn)入過濾器
注意：停止蒸汽后，要立即排出部分蒸汽并通入空氣，在過濾器溫度降低之前吹干過濾器。
注意：由于過濾器在濕的狀態(tài)阻力比較大，干了以后阻力迅速減小，因此，開空氣進(jìn)過濾器閥門時要緩慢，隨著濾芯干燥，過濾器壓力會隨之下降，需要增加空氣進(jìn)過濾器閥門開度。
? 緩慢開大隔膜閥旁路閥門，維持過濾器外殼壓力0.1Mpa左右，待用。
注意：此處流量不宜過大，不能超出過濾器工作流量。